INGÉNIEUR D'ÉTUDES EN TECHNIQUES BIOLOGIQUES - H/F

Description :MISSION PRINCIPALE :Rattachée à l'équipe « Les récepteurs nucléaires, intégrateurs de signaux endogènes et environnementaux » au Centre de Biologie Structurale (CBS), la personne recrutée œuvrera dans le cadre d'un projet de recherche financé par l'Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES). Le projet « AHRtox » vise à comprendre et prédire l'interaction du récepteur des hydrocarbures aromatiques (AHR) avec les contaminants environnementaux.

Également appelé "récepteur de l'exposome", AHR est un chimiosenseur impliqué dans un large éventail de processus pathologiques en réponse à des centaines de substances chimiques (dioxines, PCBs, .) qui exercent leur toxicité via leur liaison au récepteur AHR. L'objectif du projet AHRtox est de caractériser finement l'interaction des polluants avec AHR par des combinaisons d'approches structurales (cryo-EM, cristallographie), bio-informatiques et cellulaires afin de mieux comprendre et prédire l'impact des polluants environnementaux sur la santé humaine et les écosystèmes via leur interaction avec AHR.

L'ITA sera particulièrement impliqué dans la partie structurale du projet qui nécessite un important travail de biochimie préparative et de caractérisation fonctionnelle et structurale. ACTIVITÉS : * Assurer le clonage de gènes en systèmes bactérien et cellules d'insectes (Sf9), la production, la purification, la caractérisation et la cristallisation de protéines recombinantes * Définir et mettre en place les protocoles expérimentaux en biochimie pour la production de protéines recombinantes et la réalisation des expériences de cristallogenèse * Cloner des gènes, mutagenèse dirigée * Produire et purifier des protéines recombinantes * Caractériser les échantillons par différentes méthodes biochimiques (électrophorèse, gel natif, western blot) et biophysiques (DLS, ITC, MALS, CD, Thermofluor) * Réaliser les expériences de cristallogenèse des protéines * Concevoir les expériences, analyser et présenter les résultats Profil recherché : CONNAISSANCES : * Connaissances approfondies en biochimie et biologie moléculaire * Connaissances approfondies des techniques de purification et de caractérisation des protéines * Connaissances approfondies des techniques de culture cellulaire (bactérienne et cellules d'insecte Sf9) * Connaissances approfondies des bonnes pratiques de laboratoire (hygiène et sécurité) SAVOIR-FAIRE : * Maîtrise de la purification de plasmides et extraction d'ADN à l'aide de kits, PCR, clonage In-fusion ou par ligation * Capacité à assurer la mise en culture et l'entretien de culture bactériennes et cellulaires * Maîtrise de la réalisation de transformations et transfections * Capacité à mettre en œuvre les techniques d'extraction et de purification des protéines par chromatographie, notamment à l'aide d'un système ÄKTA * Maîtrise des principes de fonctionnement des équipements scientifiques utilisés et appliquer les procédures d'utilisation, de maintenance courante et d'entretien * Capacité à concevoir et réaliser des essais de cristallisation de protéines, en utilisant notamment des robots de cristallogenèse et des systèmes automatisés de visualisation * Maîtrise des outils informatiques et les logiciels de traitement, d'analyse et de présentation des données scientifiques (Excel, PowerPoint, GraphPad Prism, Origin) * Capacité à identifier et analyser les dysfonctionnements techniques, proposer des solutions adaptées et contribuer à leur résolution * Capacité à faire preuve d'initiative et d'anticipation dans la conduite des activités expérimentales et organiser son travail de manière autonome * Capacité à analyser et interpréter les résultats expérimentaux, assurer leur traçabilité et restituer les travaux réalisés sous forme de rapports écrits et de présentations orales APTITUDES : * Autonomie * Esprit d'équipe * Rigueur scientifique * Sens de l'organisation NIVEAU D'EXPÉRIENCE : Expérience en laboratoire de 3 ans minimum sur un sujet touchant à la purification de protéines recombinantes en systèmes eucaryote et procaryote, et à la cristallogenèse.

NIVEAU DE FORMATION : * Niveau bac +3 dans les domaines de la biologie, biochimie, biotechnologies à minima * Niveau B2 en anglais à minima